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細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒
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品牌:原鑫生物
貨號(hào):PH0311
規(guī)格:50T/¥589
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細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒

細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒圖1

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細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒基本信息:

1、 細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒說(shuō)明:經(jīng)典的細(xì)胞蛋白質(zhì)分離流程由下述主要步驟組成:清洗組織或細(xì)胞;裂解細(xì)胞;離心去沉淀獲得可溶性蛋白質(zhì)粗提物(可依據(jù) 目標(biāo)蛋白質(zhì)的理化特性特別的調(diào)配裂解緩沖液); 通過(guò)有機(jī)溶劑或鹽析等沉淀離心、層析、電泳等方法進(jìn)一步純化,得到目的產(chǎn)物蛋白。

 2、本試劑使用溫和的非離子型去污劑,適用于大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白的蛋白提取。本產(chǎn)品可應(yīng)用于從細(xì)菌裂解液中提取可溶性蛋白。 所提取的蛋白保持了生物學(xué)活性,可進(jìn)行 IP,Western Blot,蛋白純化等下游操作。


細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒產(chǎn)品儲(chǔ)存:本試劑在室溫干燥條件下,可保存 6 個(gè)月。溶菌酶貯存液、100×蛋白酶抑制劑和 50%甘油 2-8℃保存

細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒組成圖:

細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒組成圖


細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒圖2

細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒使用說(shuō)明:

1、離心收集細(xì)菌細(xì)胞, 按照每克濕菌取用 5-6ml 細(xì)菌細(xì)胞漂洗液的比例,于 20℃~37℃將細(xì)胞懸浮起來(lái)后,4℃,12000g,1-2min 離 心除去細(xì)菌細(xì)胞漂洗液,漂洗 2 次。(離心只是收集細(xì)胞,轉(zhuǎn)速、時(shí)間可自行調(diào)整。)

2、離心除去細(xì)菌細(xì)胞漂洗液后,按每克濕菌細(xì)胞,加入 5ml 細(xì)菌細(xì)胞蛋白裂解液,250ul 溶菌酶貯存液和 50ul 100×蛋白酶抑制劑,混懸 細(xì)菌細(xì)胞樣品。

3、混旋或顛倒試管幾次后,20℃~37℃溫育 10~20 分鐘,同時(shí)輕輕搖動(dòng)。 *若蛋白表達(dá)量較低,建議結(jié)合超聲粉碎,置冰上后,采用 300w,10s 超聲/10s 間隔,超聲 20min,至菌液變清或者變色。 *若目的蛋白不穩(wěn)定,可冰浴中孵育,且時(shí)間可以減少,裂解液內(nèi)加入 0.2 倍體積。

4、細(xì)胞破碎后的勻漿液,根據(jù)您不同需要可以在 10000g 離心 10min 到 100000g 離心 1h 范圍離心。沉淀?xiàng)壢ァI锨寮礊楹心康牡? 白質(zhì)的粗提物。


注意:若目的蛋白不穩(wěn)定,冰浴中孵育時(shí)間可以減少甚至取消,裂解液內(nèi)加入 0.2 倍體積 50%甘油也可以穩(wěn)定目的蛋白。

細(xì)菌細(xì)胞總蛋白提取試劑盒產(chǎn)品預(yù)定:http://www.cnnxyc.cn/products-287.html

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