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人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒的使用方法如下：

1. 試劑準備：

• 將所有試劑和樣本緩慢平衡至室溫（18-25℃），避免直接在37℃下溶解。

• 標準品（凍干品）：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，室溫靜置約10分鐘，反復顛倒以助溶解。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，依次倍比稀釋成不同的梯度。

• 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

2. 操作步驟：

• 樣品準備：將待測樣本按照說明書要求進行稀釋，并加入到相應的反應孔中。

• 包被板處理：將預包被狂犬病毒抗原的微孔板取出，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

• 加入生物素標記物：向每個反應孔中加入適量的生物素標記的單克隆抗體，4℃過夜孵育。

• 洗滌：次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

• 加入HRP酶聯物：向每個反應孔中加入HRP標記的酶聯物，室溫孵育30分鐘。

• 再次洗滌：用洗滌緩沖液洗3次。

• 加入底物液：向每個反應孔中加入底物液A和底物液B，避光反應10-15分鐘。

• 。

• 讀數：在酶標儀上于450nm波長下測定吸光度（OD值），記錄數據。

3. 結果計算：

• 根據標準曲線計算樣本中狂犬病毒糖蛋白的濃度。

• 陰性判斷、弱陽性判斷和陽性判斷均需參考試劑盒提供的標準曲線和Cut-off值。

4. 注意事項：

• 試劑盒需在4℃保存，開封后應在10天內使用完畢。

• 使用新鮮樣本或-20℃保存樣本以確保檢測結果的準確性。

• 操作過程中需避免交叉污染，確保每一步的精確性。

注：原鑫生物這款人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒基于競爭法原理，通過狂犬病毒糖蛋白與生物素標記的單克隆抗體的特異性反應，定量檢測狂犬病毒滅活樣本中的病毒糖蛋白成分，適用于科研領域。