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丙酮酸磷酸雙激酶（PPDK） 品牌：原鑫生物 類別：代測(cè)服務(wù) - LC-MS檢測(cè)|液相串聯(lián)質(zhì)譜 規(guī)格：暫無(wú)   預(yù)約待測(cè)

丙酮酸磷酸雙激酶（PPDK）

測(cè)定意義：

丙酮酸磷酸雙激酶（pyruvate phosphate dikinase, PPDK, EC 2.7.9.1）是 C4 途徑和景天科酸代 謝途徑的限速酶，催化 ATP、丙酮酸和 Pi 經(jīng)三步反響生成磷酸烯醇式丙酮酸。該酶主要存 在于 C4 植物的葉綠體基質(zhì)中，對(duì)光合功用具有重要調(diào)理作用。

測(cè)定原理：

PPDK 的逆向反響催化磷酸烯醇式丙酮酸、AMP 和 PPi 生成丙酮酸、ATP 和 Pi，乳酸脫氫 酶進(jìn)一步催化丙酮酸和 NADH 生成乳酸和 NAD+，在 340nm 測(cè)定 NADH 減少速率，計(jì)算 PPDK 活性。

測(cè)定步驟和加樣表： 

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)理波長(zhǎng)至 340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測(cè)定

（1）工作液的配制：臨用前取試劑二一瓶參加 10mL 試劑一和 5μL 試劑三，充沛混勻，置 于 37℃水浴 5min；用不完的試劑分裝后-20℃保管，制止重復(fù)凍融。

（2）在微量石英比色皿或 96 孔板中參加 10μL 樣本和 190μL 工作液，混勻，立刻記載 340nm 處初始吸光值 A1 和 37℃反響 5min 后的吸光值 A2，計(jì)算 ΔA=A1-A2。